1.原料因素:
氨基酸純度:氨基酸是多肽合成的基本單元,其純度不足會導致雜質混入,影響多肽的純度和質量。例如,消旋化的氨基酸會使合成的多肽中存在錯誤的氨基酸構型。
溶劑質量問題:溶劑用于溶解反應物和清洗樹脂等,如果溶劑中含有雜質或水分,可能會與反應物發生副反應,影響多肽合成的效率和質量。比如在Fmoc固相合成中,常用的DMF等溶劑若含有少量水,會水解活化的氨基酸。
2.設備因素:
電磁閥故障:電磁閥控制液路的串聯與閉路,在氨基酸轉移與量取、溶劑轉移與量取過程中起著關鍵作用。電磁閥出現故障可能導致液體流動不暢、量取不準確等問題,影響合成的準確性。
感應器精度問題:感應器用于監測反應過程和液體量取等,如果感應器精度不夠或出現偏差,會導致對反應條件的監測不準確,進而影響多肽合成的效果。
機械部件磨損:如攪拌裝置、傳動裝置等機械部件的磨損會影響反應的均勻性和穩定性,導致多肽合成效率降低或產物質量不一致。
3.環境因素:
溫度變化:多肽合成反應通常在一定的溫度范圍內進行,溫度過高或過低都會影響反應速率和平衡,導致副反應增加或反應不全。例如,高溫可能加速氨基酸的消旋化,低溫則可能使反應速度變慢。
濕度影響:濕度過高可能導致溶劑吸濕,影響反應體系的濃度和反應活性,同時也可能引起一些對水敏感的反應物或產物的降解。
4.人為因素:
操作失誤:操作人員在使用多肽合成儀時,如果操作不當,如加料順序錯誤、量取不準確、反應時間控制不當等,都會導致合成結果出現偏差。
參數設置錯誤:不同的多肽合成需要根據具體的實驗要求設置合適的參數,如氨基酸的用量、反應時間、溫度等。如果參數設置不合理,會影響多肽的合成效果。
